黄色网页免费看_成人黄色免费网站_一区二区三区四区精品_极品久久_国产毛片精品_伊人热

聯(lián)系電話:
131-6293-1356

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素鹽酸鹽

貨號:X10020~X10022&X10350~X10352
品牌:XYbio
CAS號:58-58-2
說明書下載X10020~X10022&X10350~X10352

產(chǎn)品介紹

訂購信息:


目錄號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

售價

X10020

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素鹽酸鹽

25mg

¥648.00

X10021

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素鹽酸鹽

100mg

¥2,160.00

X10022

Puromycin Dihydrochloride 嘌呤霉素鹽酸鹽

500mg

¥10,200.00

X13050

Puromycin(10mg/ml)嘌呤霉素鹽酸鹽溶液

1ml

¥360.00

X13051

Puromycin(10mg/ml)嘌呤霉素鹽酸鹽溶液

5*1ml

¥1,530.00

X13052

Puromycin(10mg/ml)嘌呤霉素鹽酸鹽溶液

10*1ml

¥2,700.00


產(chǎn)品說明:


CAS號

58-58-2

分子式

C22H29N7O5·2HCl

分子量

544.43 g/mol

純度

>98%

溶液內(nèi)毒素含量

< 5 EU/mg

外觀

白色至米白色粉末

熔點

175-177℃

溶解性

溶于水、DMSO、乙醇、PBS、PH7.2

運輸

冰袋運輸

保存

-20℃干燥保存。有效期4年。


使用說明:

產(chǎn)品描述:

嘌呤霉素是由Streptomyces alboniger生產(chǎn)的氨基核苷類抗生素。它能特異性地抑制原核和真核糖體上的肽鏈轉(zhuǎn)移。這種抗生素抑制革蘭陽性細菌和各種動物和昆蟲細胞的生長。嘌呤霉素在某些特定條件下也可用于大腸桿菌轉(zhuǎn)化子的篩選。嘌呤霉素的抗性是由puromycin N-acetyl-transferase的pac基因賦予的。動物細胞一般對1~10ug/ml濃度敏感。


1. 建議使用濃度

哺乳動物細胞:1-10 μg/mL,最佳濃度需要殺滅曲線來確定。

大腸桿菌:LB瓊脂培養(yǎng)基篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)化pac基因的大腸桿菌,使用濃度為125 μg/mL。

【注】:使用嘌呤霉素篩選大腸桿菌穩(wěn)轉(zhuǎn)株需要精確的pH值調(diào)節(jié),而且受宿主細胞本身的影響。


2. 溶解方法

用蒸餾水溶解嘌呤霉素配制成50 mg/mL的母液,經(jīng)0.22 μm濾膜過濾除菌后分裝于-20℃凍存;也可溶于甲醇,配制成10 mg/mL的儲存液。


3. 嘌呤霉素殺滅曲線的確定(以shRNA轉(zhuǎn)染或者慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)為例)

嘌呤霉素有效篩選濃度跟細胞類型、生長狀態(tài)、細胞密度、細胞代謝情況及細胞所處細胞周期位置等有關(guān)。為了篩選到穩(wěn)定表達的shRNA細胞株,確定殺死未轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞的最低濃度嘌呤霉素至關(guān)重要。建議初次做實驗的客戶一定要建立適合自身實驗體系的殺死曲線(kill curve)。

1)Day 1:24孔板內(nèi)以5~8×104 cells/孔的密度鋪板,鋪足夠量的孔以進行后續(xù)的梯度實驗。37℃細胞孵育過夜。
    2)Day 2:①準(zhǔn)備篩選培養(yǎng)基:含不同濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基(如0-15 μg/mL,至少5個梯度);         ②往孵育過夜后的細胞內(nèi)更換新鮮配制的篩選培養(yǎng)基;之后37℃孵育細胞。

3)Day 4:更換新鮮的篩選培養(yǎng)基,并觀察細胞存活率。

4)根據(jù)細胞的生長狀態(tài),約2-3天更換新鮮的篩選培養(yǎng)基。
5)每日監(jiān)測細胞,觀察存活細胞率,從而確定抗生素篩選開始4-6天內(nèi)有效殺死非轉(zhuǎn)染或所有非轉(zhuǎn)導(dǎo)細胞的藥物最低濃度。


4. 哺乳動物穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株的篩選

等轉(zhuǎn)染含有pac基因的質(zhì)粒后,細胞在含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基中增殖,以篩選出穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子。

1)細胞轉(zhuǎn)染48 h后,將細胞(原樣或稀釋)置于含有適當(dāng)濃度嘌呤霉素的新鮮培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

【注】:當(dāng)細胞處于分裂活躍期時,抗生素作用最明顯。細胞過于密集,抗生素產(chǎn)生的效力會明顯下降。最好進行細胞分盤使其密度不超過25%。

2)每隔2-3天,移除和更換含有嘌呤霉素的培養(yǎng)基。

3)篩選7天后評估細胞形成的病灶。病灶可能需要額外的一周或者更多時間,這依賴于宿主細胞系和轉(zhuǎn)染篩選效率。

【注】:每日進行細胞生長狀態(tài)的觀察。嘌呤霉素的篩選至少需要48 h,有效濃度嘌呤霉素的篩選周期一般在3-10天。
    4)轉(zhuǎn)移和放置5-10個抗性克隆到一個35 mm的培養(yǎng)皿中,用選擇培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)7天。此次富集培養(yǎng)是為日后的細胞毒性實驗做準(zhǔn)備。


注意事項:

1)嘌呤霉素為有毒化合物,操作時請小心拿放。

2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


本產(chǎn)品僅供科研使用,不可用于臨床診斷應(yīng)用或其他用途。   


合作客戶

聯(lián)系電話:13162931356

固定電話:0571-89925175

公司地址:杭州市西湖區(qū)金蓬街366號2號樓506,512室

Copyright 2019 杭州曉柚生物科技有限公司. 浙ICP備17006713號-1

主站蜘蛛池模板: 一区二区中文字幕 | 91亚洲免费视频 | av看片| 亚洲精品久久久狠狠狠爱 | 午夜视频在线观看网站 | 日日操夜夜 | 亚洲国产成人一区二区精品区 | 欧美日韩一区二区三区四区 | 天堂av2020 | 欧美精品网站 | 亚洲成人免费视频 | 蜜桃视频网站在线观看 | 亚洲二区在线观看 | 久久精品中文 | 欧美精品成人一区二区三区四区 | 日本丶国产丶欧美色综合 | 日韩欧美二区 | 欧美一区二区三区在线看 | 99久久婷婷 | 免费黄色网址在线播放 | 欧美亚洲国产一区 | 99热精品在线 | 国产福利在线观看 | 91精品国产综合久久福利软件 | 91精品国产综合久久婷婷香蕉 | 日本亚洲欧美 | 日韩精品在线视频观看 | 九九免费在线观看 | 99re6在线视频精品免费 | 久久精品国产亚卅av嘿嘿 | 7777奇米影视 | 日韩免费在线观看视频 | 超碰8| 久久亚洲国产精品日日av夜夜 | 国产偷录视频叫床高潮对白 | 天堂久久精品 | 欧美理论片在线 | 成人亚洲欧美 | 毛片精品| 亚洲国产青草 | 天天碰天天操 |